上海信帆生物供應(yīng)低密度脂蛋白膽固醇測(cè)試盒，提供LDL-C實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)

低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測(cè)試盒說明書

（直接法）

一、試劑組成及配制(100 管/96 樣)：

三、測(cè)定步驟：

1、樣本處理:

①、血清(漿)：直接測(cè)定，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。

②、培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清測(cè)定。

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/ml 以上。

③、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g)：體積(ml)=1：9 的比例，加入 9 倍體積的勻漿介 質(zhì)，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液待測(cè)。

[注]:1、如組織樣本為非高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。 2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取。

④、細(xì)胞樣本：

A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出，1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉 淀；用等滲緩沖液（推薦 0.1mol/L 、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液）清洗 1～2 次，同樣 1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上清液，留細(xì)胞沉淀；

B、細(xì)胞破碎:加入 0.2～0.3ml 的勻漿介質(zhì)（推薦 0.1mol/L、pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水）進(jìn)行勻漿，冰水浴條件下超聲破碎(功率：300W,3～5 秒/次，間隔 30 秒，重復(fù) 3～ 5 次)或手動(dòng)勻漿，制備好的勻漿液不離心待測(cè)。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100，

1～2%，裂解 30～40 分鐘)，裂解好的液體不離心直接測(cè)定

[注]：一般建議細(xì)胞密度在 100 萬(wàn)個(gè)/ml 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎*

1、試劑空白管吸光度≤0.050（光徑 0.5cm）。

2、靈敏度：測(cè)試 2.6mmol/L 被測(cè)物時(shí)，吸光度差值△A 為 0.180～0.280

3、線性范圍：2～12mmol/L，r2＞0.995

4、精密度：變異系數(shù)≤8%，批間差：相對(duì)偏差≤10%

5、穩(wěn)定性：原包裝試劑盒在 2℃～8℃避光保存，有效期為 12 個(gè)月。開啟后 2℃～8℃避光保存， 可穩(wěn)定一個(gè)月。

四、注意事項(xiàng):

1、本產(chǎn)品僅用于科研，不得用于研究診斷，切勿服用。

2、樣品含量如超出檢測(cè)范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照比色杯體積，按比例增減。

2、樣品含量如超出檢測(cè)范圍上*，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

3、試劑防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

4、試劑與樣本量可按照比色杯體積，按比例增減。

低密度脂蛋白膽固醇測(cè)試盒現(xiàn)貨供應(yīng)，提供LDL-C實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù)